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当你读一篇研究文章时,你看到的是一个成品。在完成的产品背后是无数小时、周、月,甚至可能是数年的时间和努力,这些时间和努力都花在了这篇发表的文章上。不仅实验需要时间,设置和排除所使用的所有技术也需要时间。在科学中,你第一次尝试很少会成功;机器会崩溃,程序会崩溃,你的整个过程可能会失败。这就是为什么科学中最重要、但往往被低估的技能之一是能够在事情出错时进行故障排除。

我的研究的一个主要组成部分是Gad1,这是一个编码GABA的基因,GABA是大脑中主要的抑制性神经递质。为了瞄准这个基因,我必须能够染色我用来可视化Gad1的脑组织。我很快发现这并不是一件容易的事情。

每一张图片都展示了来自不同老鼠大脑的神经元。在这些图像中,蓝色是所有神经元的标记。前三张图中的紫色和红色显示试图用免疫组化(IHC)染色Gad1。免疫组化是一种蛋白质染色剂,对其他类型的细胞如多巴胺和血清素染色效果很好。不幸的是,免疫组化对GABA不起作用。正如你在这些图像中看到的,每个染色剂都有高背景染色,只有很少的神经元被染色。在对这种技术进行了几个月的排除后,我决定改变方法,使用荧光原位杂交(FISH),它的靶标是mRNA而不是蛋白质。最终图像显示Gad1成功染成粉红色。这里你可以清楚地看到gaba能神经元几乎没有背景染色。这种成功的Gad1染色在排除免疫组化、切换到FISH和调整FISH协议之间花费了将近一年的时间。 As a scientist, one of my jobs is to find the most effective ways to conduct experiments, and in order to execute effective science you need to be able to troubleshoot when things go wrong. So, the next time you see a research article, keep in mind that you are seeing the final product. As in life, things in science don’t always go as planned. When this happens, shake it off and just keep swimming.

由Maddie Ray,波士顿学院三年级博士研究生和我们2018年秋季特约艺术家贡献。想要见到Maddie并看到更多她的作品,点击在这里

一个想法"继续游泳

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